Unha vez que as células cultivamos

fábrica de célulasestán contaminados, a maioría deles son difíciles de manexar.Se as células contaminadas son valiosas e difíciles de obter de novo, pódense utilizar os seguintes métodos para eliminalas.

1. Usa antibióticos

Os antibióticos son máis eficaces para matar bacteriasfábricas celulares.A medicación combinada é máis eficaz que a medicación só.A medicación preventiva é máis efectiva que a medicación despois da contaminación.A medicación preventiva adoita empregar un dobre antibiótico (penicilina 100u/ml máis estreptomicina 100μg/ml).Despois da contaminación, o método de limpeza debe ser de 5 a 10 veces maior que a cantidade habitual.O medicamento debe usarse durante 24 a 48 horas despois da adición, e despois substituílo pola rutina habitual.Fluído de cultivo.Este método pode ser eficaz nas primeiras fases da contaminación.Ademais da penicilina e a estreptomicina, os antibióticos utilizados tamén poden incluír gentamicina, kanamicina, polimixina, tetraciclina, nistatina, etc. Os antibióticos que se usan habitualmente son de 400 a 800 μg/mL de kanamicina ou 200 μg/mL de tetraciclina.O medio cámbiase cada 2 ou 3 días e transmítese durante 1 ou 2 xeracións para o tratamento.Nos últimos anos, informouse de que 4-fluoro, 2-hidroxiquinolina (Ciprofloxacino, Cip), derivado de pleu-romutilina (derivado de pleu-romutilina, BM-Cyclin2: BM-1 e derivado de tetraciclina (BM-2)) son antibióticos. eficaz para matar o micoplasma cando se usa só ou en combinación.Estes tres antibióticos prepáranse en solucións concentradas 250X en PBS e almacénanse a -20 °C para o seu uso posterior.A concentración de uso de Cip é de 10 μg/mL, BM-1 é de 10 μg/mL e BM-2 é de 5 μg/mL.Cando se use, primeiro aspirar o medio de cultivo contaminado, engadir o medio de cultivo RPMI1640 que contén BM-1, despois aspirar o medio de cultivo despois de 3 días, engadir o medio de cultivo RPMI1640 que contén BM-2 e o cultivo durante 4 días, e así sucesivamente durante 3 días consecutivos. .redondas, ata que se comprobe mediante microscopía de tinción fluorescente 33258 que o micoplasma foi eliminado, entón engádese medio de cultivo normal para o cultivo e o paso 3-4 veces.

2. Tratamento térmico

Incubando o cultivo de tecidos contaminados a 41 °C durante 18 horas pode matar o micoplasma, pero ten efectos adversos sobre as células.Polo tanto, debe realizarse unha proba preliminar antes do tratamento para explorar o tempo de quecemento que pode matar o micoplasma na máxima medida e ter o menor impacto nas células.Este método ás veces non é fiable.Se se trata primeiro con medicamentos e despois se quenta a 41 °C, o efecto será mellor.

3. Utilizar soro específico de micoplasma

A contaminación por micoplasma pódese eliminar cun soro inmune de micoplasma de coello ao 5% (título de hemaglutinación 1:320 ou superior).Dado que o anticorpo específico pode inhibir o crecemento do micoplasma, vólvese negativo 11 días despois do tratamento con antisuero e permanece negativo 5 meses despois.é negativo.Non obstante, este método é máis problemático e non é tan cómodo e económico como o uso de antibióticos.

4. Outros métodos

Ademais dos métodos mencionados anteriormente para eliminar a contaminación, tamén hai métodos de inoculación e esterilización en animais, métodos de fagocitose de macrófagos, métodos de engadir bromouracilo aos contaminados.botellas de cultivoe despois irradiándoos con luz, e métodos de filtración, etc., pero todos son máis problemáticos e ineficaces.Polo tanto, unha vez que se produce a contaminación por micoplasma, a non ser que teña un valor especialmente importante, é xeralmente descartado e recultivo.

póñase en contacto con Whatsapp e Wechat: +86 180 8048 1709